分光光度計是理化分析中常用的儀器。它的基本原理是建立在光與物質相互作用的基礎上，當光子和某一溶液中吸收輻射的物質分子相碰撞時，就發生吸收，測量其吸光度值的大小可反映某種物質存在的量的多少。光的吸收程度與濃度有一定的比例關系，這就是的比直定律。該定律成立的必要條件是單色光（單一波長光）照射樣品。為了使該定律具有良好的線性，對測量濃度有一定的范圍要求。
　　分光光度計使用方法步驟：
　　1)預熱儀器。為使測定穩定，將電源開關打開，使儀器預熱20min，為了防止光電管疲勞，不要連續光照。預熱儀器時和在不測定時應將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷。
　　2)選定波長。根據要求，轉動波長調節器，使指針指示所需要的單色光波長。
　　3)固定靈敏度檔。根據有色溶液對光的吸收情況，為使吸光度讀數為0.2-0.7，選擇合適的靈敏度。為此，旋動靈敏度檔，使其固定于某一檔，在實驗過程中不再變動。一般測量固定在“1”檔。
　　4)調節“0”點。輕輕旋動調“0”電位器，使讀數表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時，比色皿暗箱蓋是打開的，光路被切斷，光電管不受光照)。
　　5)調節T=100%。將盛蒸餾水(或空白溶液或純溶劑)的比色皿放入比色皿座架中的*格內，有色溶液放在其它格內，把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上，轉動光量調節器，使透光度T=100%，即表頭指針恰好指在T=100%處。
　　6)測定。輕輕拉動比色皿座架拉桿，使有色溶液進入光路，此時表頭指針所示為該有色溶液的吸光度A。讀數后，打開比色皿暗箱蓋。
　　7)關機。實驗完畢，切斷電源，將比色皿取出洗凈，并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。