UV1901PC紫外分光光度計的用法及使用過程

紫外分光光度計是根據樣品的濃度和吸光度是成正比關系的，濃度越大，吸收值越高，也就是瑯伯-比爾定律的原理研發的測試物質含量以及定性的實驗室常用儀器。它的應用領域涉及制藥、醫療衛生、化學化工、計量科學、農業、林業、漁業等領域中的科研、教學等各個方面，用來進行定性分析、純度檢查、結構分析、絡合物組成及穩定常數的測定、反應動力學研究等。

所以紫外分光光度計用的zui多的還是定量分析，定量分析的種類有很多，這里介紹常用的幾種定量分析方法：

1、法：法是紫外可見分光光度計諸多分析方法中使用zui多的一種方法。這是一種以瑯伯-比爾定律A=εbC為基礎的分析方法，某一物質在一定波長下ε值是一個常數，石英比色皿的光程是已知的，也是一個常數。因此，可用紫外可見分光光度計在λmax波長處，測定樣品溶液的吸光度值A。然后，根據瑯伯比爾定律求出C=A/εb，則可求出該樣品溶液的含量或濃度。

2、標準法：在選定的波長處，在相同的測試條件下，分別測試標準樣品溶液C標和被測試樣品溶液C樣的吸光度A標和A樣。然后，按下式求得樣品溶液的濃度或含量。

C樣=A樣/A標×C標

3、標準曲線法

紫外可見分光光度計zui常用的定量分析方法是標準曲線法。即先用標準物質配制一定濃度的溶液，再將該溶液配制成一系列的標準溶液。在一定波長下，測試每個標準溶液的吸光度，以吸光度值為縱坐標，標準溶液對應得濃度為橫坐標，繪制標準曲線。zui后，將樣品溶液按標準曲線繪制程序測得吸光度值，在標準曲線上查出樣品溶液對應的濃度或含量。

4、 其它分析方法

除上述幾個分析方法外經常使用的分析方法外，還有比吸收系數法、zui小二乘法、解聯立方程法和示差分光光度法。

(2) 定性分析

如果未知物的紫外吸收光譜的zui大吸收峰波長λmax、zui小吸收峰波長λmin、zui大摩爾吸光系數εmax，以及吸收峰的數目、位置、拐點與標準光譜數據*一致，就可以認為是同一種化合物。定性分析的主要目的是知道分析樣品中是什么物質。

定量分析和定性分析是分光光度計的兩大主要功能，特別是定量分析。其它的分析都應該是從這兩大種功能中發展出來的。

儀器的使用情況說明：

先將UV1901PC紫外分光光度計開機自檢后

UV1901PC紫外分光光度計進入自檢狀態，分別檢測微機系統、濾光片驅動馬達定位、鎢燈電壓和氘燈電流、燈源初始位，自檢氘燈能量及鎢燈能量，并自動校準波長（以氘燈譜線656.1nm為基準）。

按[↑][↓]鍵選擇所需功能項，選中項將反顯，按[ENTER]鍵進入子菜單功能塊。

按UV1901PC紫外分光光度計[GOTO WL]鍵修改波長，光標自動閃爍在波長輸入處，用數字鍵輸入您所需測定的波長值，確認后按[ENTER]鍵加以確定。（本例波長為500nm）

    屏幕提示：請稍后···

UV1901PC紫外分光光度計在自動將波長調整到您所需測定的波長值。如輸入數值有錯，請按[CE]鍵清除后重新輸入。如波長選擇不在可選擇范圍內（190 nm～1100nm）。

屏幕提示：輸入錯誤 

此時輸入正確波長即可。

屏幕中zui下方的四個功能，分別由儀器鍵盤上的四個功能鍵來實現。

F1：為您提供測試數據類型選擇：T（透射比）

F2：為您提供測試數據類型選擇：Abs（吸光度）

F3：為您提供測試數據類型選擇：Conc（濃度）

F4：對所測得數據進行打印輸出

當您把所需參數輸入結束后，用一對配套石英比色皿倒入參比樣品（本例參比樣品為空氣）。分別放入參比光路和樣品光路。然后按下[ZERO]鍵。

    屏幕提示：Blanking  100%

儀器在自動調整0%（暗電流）及100%（滿度）。自調結束屏幕提示消失后，取出樣品光路中的比色皿，重新倒入待測樣品并放回樣品光路樣品池，蓋好樣品盒蓋，此時就可得到您所需數據。